La influencia de la diferencia de sexo en el comportamiento y la neurogénesis del hipocampo adulto en ratones C57BL/6

Scientific Reports volumen 13, número de artículo: 17297 (2023) Citar este artículo

198 Accesos

Detalles de métricas

Los modelos animales se han utilizado ampliamente en estudios in vivo, especialmente en el campo biomédico. Tradicionalmente, se utilizan estudios de un solo sexo, en su mayoría masculinos, para evitar cualquier posible variación de confusión causada por la diferencia de sexo y el ciclo estral femenino. Históricamente, se cree que las hembras animales exhiben una mayor variabilidad, y esto podría aumentar el poder estadístico necesario para probar una hipótesis. Este estudio se propone evaluar si existe una diferencia de sexo en el comportamiento de los ratones y si las hembras presentan una mayor variabilidad. Evaluamos las habilidades sensoriomotoras, el comportamiento similar a la ansiedad, el comportamiento similar a la depresión y las capacidades cognitivas de los ratones a través de una serie de pruebas de comportamiento de uso común. Excepto por la mayor fuerza de agarre y la menor sensibilidad sensorial táctil detectadas en ratones macho, no hubo diferencias significativas entre machos y hembras en otras pruebas. Además, el inmunomarcaje de los marcadores de neurogénesis no sugirió diferencias significativas entre sexos en la neurogénesis del hipocampo en adultos. Dentro del grupo, las variaciones fueron equivalentes; las hembras no exhibieron mayor variabilidad que los machos. Sin embargo, los resultados negativos generales podrían deberse a la limitación del tamaño pequeño de la muestra. En conclusión, nuestro estudio proporciona evidencia de que la diferencia de sexo en ratones no influye significativamente en estas pruebas de comportamiento comúnmente utilizadas ni en la neurogénesis adulta en condiciones basales. Sugerimos que también se podrían considerar ratones hembra para la inclusión de pruebas en el diseño de experimentos futuros.

Los modelos animales se han utilizado en la investigación científica durante más de dos mil años y se remontan a la antigua Grecia1. Entre ellos, los ratones (Mus musculus) sirven como uno de los mejores organismos modelo por su similitud genética con los humanos, su facilidad de reproducción y sus bases de datos bien establecidas2. Sin embargo, se ha observado diferencia de sexo en roedores, donde machos y hembras exhiben diferentes estructuras anatómicas, fisiología y ciertos comportamientos3,4,5. Históricamente, también se ha considerado que el ciclo estral aumenta la variación en las mujeres en relación con sus homólogos masculinos. Esta divergencia entre sexos puede atribuirse a una combinación de factores genéticos, hormonales y ambientales.

Durante décadas, se han utilizado cohortes de ratones exclusivamente machos para evitar los efectos de confusión del ciclo estral femenino y otras variables potenciales que pueden interferir con los resultados experimentales6. Sin embargo, estudios recientes han cuestionado el uso de un solo sexo en la investigación con animales. La subrepresentación de mujeres no sólo limita nuestra comprensión, sino que también puede conducir a resultados sesgados por sexo. En 2016, los Institutos Nacionales de Salud (NIH) implementaron una política que requiere el uso de ambos sexos en la investigación con animales vertebrados, destacando la importancia de los efectos sexuales. Por lo tanto, la inclusión de sujetos femeninos es fundamental para mejorar la generalización y garantizar tanto la validez como la confiabilidad de los hallazgos de la investigación. Con la creciente atención, la diferencia de sexo en los estudios con animales ha sido un tema activo en la investigación biológica. Comprender el impacto de la diferencia de sexo será de gran importancia tanto para avanzar en nuestro conocimiento como en la aplicación de animales de experimentación.

En nuestro estudio, nuestro objetivo fue examinar posibles diferencias sexuales en el comportamiento animal, junto con una comparación de variaciones entre machos y hembras. En este estudio se eligieron ratones C57BL/6 debido a su menor ansiedad en comparación con otras cepas endogámicas, lo que los convierte en mejores sujetos para la evaluación del comportamiento animal7. También son una de las cepas endogámicas más utilizadas y sirven como base para muchas líneas transgénicas en la investigación neurobiológica. Sometimos a 12 ratones C57BL/6 machos y 12 hembras a una serie de pruebas de comportamiento para medir sus habilidades sensoriomotoras, comportamientos similares a la ansiedad, comportamientos similares a la depresión y habilidades cognitivas. También se investigó la neurogénesis del hipocampo en adultos, ya que se había demostrado un efecto sexual en la neurogénesis de ratas adultas8. Nuestro estudio proporciona una descripción general de las diferencias de sexo en estos ensayos de comportamiento de uso común y podría servir como referencia para el modelo de ratón utilizado en la investigación científica.

Para examinar la diferencia de sexo en el comportamiento animal, sometimos a ratones macho y hembra C57BL/6 de 8 semanas de edad (n = 12) a una serie de pruebas de comportamiento para una investigación exhaustiva (Fig. 1a), para evaluar las habilidades sensoriomotoras. , respuestas emocionales y habilidades cognitivas. Todas las pruebas se analizaron mediante una prueba de potencia post hoc (Tabla complementaria S1).

Los machos exhibieron una mayor fuerza de agarre y una menor sensibilidad sensorial táctil. (a) Cronograma del diseño experimental. D representa el día después de la evaluación del comportamiento. (b) Los ratones machos mostraron una fuerza de agarre más fuerte que las hembras. (c) No se observaron diferencias significativas entre sexos en la latencia para caer durante la prueba rotarod. (d) No se observaron diferencias significativas entre sexos en el número de fallas durante la tarea de la viga de la escalera. (e – f) Los ratones macho exhibieron un umbral de retirada más alto en la pata trasera izquierda y en la pata trasera derecha durante la prueba de Von Frey. (g) No se observaron diferencias significativas entre sexos en la latencia de respuesta durante la prueba del plato caliente.

En la prueba de agarre, la fuerza de agarre promedio de los ratones macho fue de 89,72 ± 2,67 gf (fuerza en gramos). Esto es significativamente más fuerte que el de las ratonas, cuya fuerza de agarre promedio fue de 78,61 ± 2,87 gf (t(22) = 2,77, p = 0,01) (Fig. 1b). Luego se realizaron pruebas de rotarod y viga de escalera para evaluar la coordinación motora. No detectamos diferencias significativas en ninguna de estas dos pruebas, lo que indica una coordinación motora comparable entre hombres y mujeres (rotarod: t(22) = 1,01, p = 0,32; viga de escalera: t(22) = 0,67, p = 0,50) (Fig. .1c y d).

Luego evaluamos la sensibilidad sensorial midiendo el umbral de respuesta a los estímulos. En la prueba de Von Frey, se utilizó un filamento para pinchar la superficie plantar de las patas traseras de un ratón con fuerza creciente. La fuerza máxima cuando el animal levantaba las patas se registró como umbral de retirada. El umbral de retirada de 4,24 ± 0,22 gf en las patas traseras izquierdas se midió en los machos, mientras que en las hembras se midió 3,42 ± 0,18 gf (t (22) = 2,884, p = 0,008) (Fig. 1e). Para las patas traseras derechas, se detectó un umbral de retirada de 4,26 ± 0,12 gf en los machos, y de 3,60 ± 0,16 gf en las hembras (t(22) = 3,27, p = 0,003) (Fig. 1f). Se mostró una diferencia de sexo en el umbral tanto para el pie izquierdo como para el derecho, lo que sugiere una menor sensibilidad sensorial táctil en los ratones macho. La placa caliente fue otra prueba de sensibilidad sensorial y registró la latencia de los ratones en respuesta a estímulos térmicos. No se observaron diferencias significativas en la latencia de respuesta entre sexos, lo que implica una sensibilidad similar a los estímulos térmicos (U = 57,00, p = 0,40) (Fig. 1g). En conjunto, existía una diferencia de sexo en el agarre y la sensibilidad sensorial al tacto, pero la coordinación motora y la sensibilidad al calor eran equivalentes entre ratones machos y hembras.

En estudios anteriores se ha discutido la divergencia en el comportamiento similar a la ansiedad entre roedores machos y hembras. Curiosamente, algunos estudios han mencionado la dificultad de sacar conclusiones, ya que los resultados diferían en varias pruebas, lo que hacía que la interpretación fuera bastante desafiante4,9.

Para examinar los efectos del sexo en las respuestas emocionales, probamos comportamientos similares a la ansiedad y la depresión en ratones. Se realizaron pruebas de campo abierto, laberinto en cruz elevado y caja de luz-oscuridad para evaluar la ansiedad. En la prueba de campo abierto, tanto la distancia recorrida como el tiempo que los ratones pasaron en la zona central fueron comparables entre los sexos, lo que sugiere un nivel equivalente de actividad locomotora y ansiedad (distancia: t(22) = 1,54, p = 0,13; tiempo: t (22) = 0,01, p = 0,98) (Figura 2a). En el laberinto elevado, aunque las hembras recorrieron una distancia más larga en comparación con los machos, no hubo diferencias significativas en el tiempo dedicado a los brazos abiertos (distancia: U = 31,00, p = 0,02; tiempo: U = 55,00, p = 0,34) (Figura 2b). También calculamos el tiempo relativo de exploración en los brazos abiertos, que también mostró equivalencia entre los grupos (t(22) = 1,10, p = 0,28), con los hombres gastando 38,62 ± 3,80% del tiempo de exploración en los brazos abiertos y las mujeres gastando 42,90. ± 0,79% del tiempo de exploración. En el cuadro claro-oscuro, debido a la imposibilidad de rastrear la distancia recorrida dentro del cuadro oscuro, registramos el número de transiciones entre cámaras. El número de transiciones no mostró diferencias entre sexos, ni el tiempo pasado en la caja de luz (transición: t(22) = 0,24, p = 0,80; tiempo: t(22) = 0,67, p = 0,50) (Fig. 2c ). En conjunto, las tres pruebas de comportamiento relacionadas con la ansiedad mostraron una buena concordancia en que no se observó ninguna diferencia sexual aparente en estos ensayos de comportamiento de uso común.

No se detectaron diferencias de sexo significativas en el comportamiento similar a la ansiedad a pesar de la discrepancia en los niveles de corticosterona. (a) En la prueba de campo abierto, no se midieron diferencias significativas entre sexos en la distancia recorrida, el tiempo que los ratones pasaron en la zona central y el número de transiciones. (b) En el laberinto elevado, las hembras recorrieron distancias más largas, mientras que el tiempo que los ratones pasaron en los brazos abiertos y el número de transiciones fueron equivalentes entre los sexos. (c) En la caja clara-oscura, no se midieron diferencias significativas entre sexos en la distancia recorrida en la caja luminosa, el tiempo pasado en la caja luminosa y el número de transiciones. (d) Los ratones hembra exhibieron un nivel basal de corticosterona en plasma más alto en condiciones basales, mientras que los niveles de corticosterona en plasma fueron equivalentes entre sexos en condiciones de estrés y en condiciones de recuperación.

A pesar de que no se observaron diferencias significativas en las pruebas de ansiedad, investigamos si las concentraciones plasmáticas de corticosterona diferían entre sexos. Para probar esto, cuantificamos los niveles plasmáticos de corticosterona en tres momentos diferentes: la condición inicial (basal), después de 30 minutos de estrés de restricción (estresado) y después de 60 minutos de recuperación del estrés de restricción (recuperado). En condiciones basales, la concentración de corticosterona plasmática fue de 20,05 ± 5,14 ng/ml en hombres y 41,60 ± 7,93 ng/ml en mujeres (t(22) = 0,03, p = 0,03) (Fig. 2d, izquierda), lo que indica una mayor nivel basal de corticosterona en ratones hembra. Después de 30 minutos de estrés de sujeción, los niveles de corticosterona aumentaron a 350–450 ng/ml y no hubo diferencias significativas entre sexos (t(22) = 0,93, p = 0,35) (Fig. 2d, centro). Una hora después de finalizar el estrés de inmovilización, el nivel de corticosterona disminuyó a 65–80 ng/ml y no se detectó ninguna diferencia aparente (t(22) = 0,64, p = 0,52) (Fig. 2d, derecha). En general, a pesar de un nivel de ansiedad comparable mostrado en los ensayos conductuales, el nivel inicial de corticosterona se mostró más alto en las mujeres que en los hombres; los niveles de corticosterona después del estrés de inmovilización y después de la recuperación del estrés fueron equivalentes entre sexos.

Para evaluar el comportamiento similar a la depresión, se utilizan comúnmente pruebas de alimentación suprimida por novedad, natación forzada y suspensión de la cola. Durante la prueba de alimentación suprimida por novedad, los ratones machos y hembras mostraron una latencia similar para comenzar a comer los gránulos de comida y la duración de la comida, lo que sugiere que no hay diferencias significativas en el nivel de depresión (latencia: t(22) = 0,19, p = 0,84; tiempo: t (22) = 1,74, p = 0,09) (Figura 3a). En la prueba de natación forzada y la prueba de suspensión de la cola, la inmovilidad de los ratones se consideró un comportamiento similar a la depresión, ya que los ratones dejaron de luchar en condiciones tan estresantes. El tiempo inmóvil fue similar entre hombres y mujeres tanto en la prueba de natación forzada como en la prueba de suspensión de cola (natación forzada: t(22) = 0,91, p = 0,36; suspensión de cola: t(22) = 1,61, p = 0,12) ( Figuras 3b yc). En consecuencia, no se detectó ninguna diferencia de sexo significativa en el comportamiento similar a la depresión.

No se detectaron diferencias de sexo significativas en el comportamiento similar a la depresión. (a) No hubo diferencias significativas entre sexos en la latencia para comer el alimento ni en el momento de comer durante la prueba de alimentación con novedad suprimida. (b) No hubo diferencias significativas entre sexos en el tiempo de inmovilidad durante la prueba de natación forzada. (c) No hubo diferencias significativas entre sexos en el tiempo de inmovilidad durante la prueba de suspensión de la cola.

Los estudios han discutido previamente las diferencias sexuales en la cognición, y algunos informaron que el sexo es un factor de riesgo potencial para los déficits cognitivos en enfermedades neurodegenerativas10,11,12,13,14. Para ver si la diferencia de sexo afecta el aprendizaje y la memoria, realizamos pruebas de laberinto acuático de Morris, laberinto T y evitación activa. Todas estas pruebas involucran diferentes aspectos de la función cognitiva. El laberinto acuático de Morris es una de las pruebas más utilizadas para evaluar el aprendizaje espacial en roedores. Con una plataforma escondida debajo de la superficie del agua, se entrenó a ratones para buscar la plataforma. La longitud del camino requerido por los ratones para llegar a la plataforma disminuyó con pruebas sucesivas, lo que demuestra que los ratones se adaptaron más para determinar la ubicación de la plataforma. Los ratones mostraron buenas curvas de aprendizaje en el aprendizaje espacial y mostraron un efecto significativo de las pruebas sucesivas (F (11,242) = 27,75, p <0,0001). No hubo diferencias notables entre la curva de aprendizaje masculina y la femenina (F (1,22) = 0,23, p = 0,63), lo que indica un aprendizaje espacial comparable entre sexos (Fig. 4a). El laberinto T es una prueba para evaluar la memoria de trabajo, mediante la cual se evalúa el comportamiento exploratorio y la discriminación espacial de los ratones. El nuevo brazo se definió como "correcto" basándose en la suposición de que un ratón normalmente exploraría un nuevo entorno si pudiera distinguirlo de un área que había explorado previamente. Los resultados de las pruebas del laberinto T mostraron un porcentaje equivalente de elecciones correctas entre hombres y mujeres, lo que implica una memoria de trabajo similar (U = 60,00, p = 0,46) (Fig. 4b). La evitación activa es una tarea de evitación asociada motivada por el miedo, que requiere que los ratones asocien los estímulos incondicionados (US) con los estímulos condicionados (CS). El porcentaje de evitación aumentó con el tiempo, revelando un efecto significativo de las pruebas (F(3,66) = 157,7, p < 0,0001). No hubo diferencias evidentes entre las dos curvas de aprendizaje (F (1,22) = 2,58, p = 0,12), lo que muestra un aprendizaje de evitación comparable (Fig. 4c). En resumen, no se encontraron diferencias de sexo significativas en las pruebas cognitivo-conductuales.

No se detectaron diferencias de sexo significativas en el aprendizaje y la memoria. (a) Hombres y mujeres mostraron patrones de curva de aprendizaje similares en la prueba del laberinto acuático de Morris. (b) Hombres y mujeres mostraron un porcentaje comparable de elección correcta en el laberinto T. (c) Hombres y mujeres mostraron patrones de curva de aprendizaje similares en la prueba de evitación activa.

Investigaciones anteriores han revelado una diferencia de sexo en la neurogénesis de ratas adultas, lo que sugiere que el estrógeno estimula la cantidad de neuronas recién nacidas en el hipocampo de rata8. Para probar si existe una diferencia de sexo en la neurogénesis del hipocampo adulto en ratones, utilizamos tinción inmunoquímica. Se seleccionaron KI67, Tbr2, NeuroD y Doublecortin (DCX) como objetivos para la tinción debido a sus distintos períodos de expresión como marcadores de neurogénesis. KI67 representa un marcador de células en proliferación; Tbr2 es un marcador de los progenitores intermedios tempranos. NeuroD y DCX son marcadores de neuronas inmaduras15. No encontramos diferencias significativas entre hombres y mujeres en el número de células que expresan marcadores de neurogénesis (KI67: t(22) = 1,77, p = 0,08; Tbr2: t(22) = 0,43, p = 0,66; NeuroD: t(22) = 0,25, p = 0,80; DCX: t(22) = 1,07, p = 0,29), lo que indica que la diferencia de sexo no afectó la neurogénesis del hipocampo adulto en ratones (Fig. 5).

No se detectaron diferencias de sexo significativas en la neurogénesis del hipocampo en adultos. (a) No se encontraron diferencias significativas entre sexos en las células KI67+ en la circunvolución dentada. (b) No se encontraron diferencias significativas entre sexos en las células Tbr2+ en la circunvolución dentada. (c) No se encontraron diferencias significativas entre sexos en las células NeuroD+ en la circunvolución dentada. (d) No se encontraron diferencias significativas entre sexos en las células DCX+ en la circunvolución dentada. Las barras de escala representan 100 µm.

Tradicionalmente se ha considerado que las mujeres presentaban mayor variabilidad que los hombres debido al ciclo estral16. Un estudio incluso demostró que las hembras eran menos predecibles cerca de la ovulación17. Sin embargo, no existe ningún fundamento real para esta creencia y recientemente una creciente evidencia ha cuestionado esta suposición6,18. Para comprender el efecto del sexo sobre la variabilidad, comparamos las variaciones de ratones machos y hembras en las pruebas de comportamiento mediante una prueba F (Tabla 1). Entre 23 resultados de análisis estadísticos, sólo la latencia para comer los gránulos de comida en la prueba de alimentación suprimida por novedad mostró una diferencia significativa en la varianza, en la que las hembras exhibieron una varianza menor que los machos. La comparación de varianzas mostró una varianza general aproximadamente igual entre hombres y mujeres.

Las pruebas de comportamiento animal son un enfoque importante en la investigación biomédica para evaluar los efectos de genes o fármacos. Tradicionalmente, se utilizan predominantemente sujetos masculinos para evitar posibles factores de confusión provenientes del ciclo estral femenino. Varios estudios han indicado que el ciclo estral en las hembras podría influir en el comportamiento animal e incluso en la neurogénesis adulta en roedores8,10,19,20. También se cree que las mujeres pueden presentar una mayor variabilidad que los hombres16,17. Recientemente, se ha argumentado que las hembras deberían incluirse en la investigación para evitar resultados sesgados por sexo. Por lo tanto, este estudio buscó examinar si la diferencia de sexo influyó en los resultados de las pruebas de comportamiento y la varianza en ratones.

Nuestros datos muestran que las mujeres exhibieron una fuerza de agarre más débil y una mayor sensibilidad sensorial cutánea. Por el contrario, no se detectaron diferencias significativas en otras pruebas, incluidas la coordinación motora, el comportamiento similar a la ansiedad, el comportamiento similar a la depresión y la función cognitiva. En general, nuestros datos muestran coherencia con nuestros propios trabajos anteriores en el sentido de que no se detectaron diferencias de sexo significativas en el comportamiento animal21,22. Sin embargo, algunos estudios han reportado patrones de comportamiento diferentes entre hombres y mujeres en ansiedad, aprendizaje y memoria9,23. Estos resultados contradictorios entre diferentes estudios publicados podrían atribuirse a muchos factores, incluidos los antecedentes genéticos, las condiciones ambientales y el procedimiento de manipulación, que analizaremos más adelante24,25,26,27,28. En cuanto a las pruebas en las que detectamos diferencias de sexo, era plausible que las hembras exhibieran una fuerza de agarre más débil debido a que tenían una masa de músculo esquelético significativamente menor. Un trabajo previo también ha demostrado un resultado similar29. Sin embargo, no se comprende completamente por qué las hembras mostraron una mayor sensibilidad táctil en comparación con los machos. La diferente morfología de la piel podría ser una razón30.

Cuando probamos la reactividad del eje hipotálamo-pituitario-suprarrenal (HPA), los ratones hembra mostraron una línea base de corticosterona plasmática más alta en comparación con los ratones macho, a pesar de que no hubo diferencias significativas en los niveles de corticosterona en la condición de estrés ni de recuperación. No es sorprendente que las mujeres exhibieran un valor basal de corticosterona plasmática más alto, ya que así se ha demostrado en otros trabajos31,32,33. Muchos estudios han sugerido que existen diferencias de sexo en la respuesta del eje HPA, afectado directa o indirectamente por las hormonas esteroides gonadales, poblaciones específicas de neuronas del factor liberador de corticotropina (CRF) en regiones cerebrales clave relacionadas con el estrés y la distribución de los receptores de corticosteroides en el cerebro31,34,35,36. En cuanto al nivel de corticosterona en la condición de estrés, no se detectó diferencia entre sexos. Hay dos posibilidades para esto: una es que dado que la corticosterona plasmática aumentó dramáticamente después de 30 minutos de estrés, es difícil detectar pequeñas diferencias potenciales entre hombres y mujeres. La otra es que, dado que solo probamos un momento, no podemos excluir la posibilidad de que hayamos perdido el mejor momento para detectar la diferencia de sexo. Para el nivel de corticosterona después de una hora de recuperación, teóricamente el resultado debería ser similar al valor inicial. Es posible que se requiera un período de tiempo más largo, o un transcurso de tiempo, para ver los cambios de la corticosterona plasmática después de la recuperación y cualquier posible diferencia de sexo.

Además de los fenotipos de comportamiento, también comparamos las variaciones dentro del grupo entre hombres y mujeres. Tradicionalmente, se cree que el ciclo estral aumenta la variabilidad en las mujeres16,17. Sin embargo, nuestros resultados sugirieron que hombres y mujeres mostraron variaciones similares dentro del grupo. Esto concuerda con otros estudios y metanálisis que apoyan la idea de que el sexo femenino o el nivel de estradiol endógeno no ejerce un efecto tan profundo sobre la variabilidad18,37,38,39,40. Con base en este hallazgo, creemos que las mujeres deberían, justificadamente, incluirse en futuras investigaciones científicas.

Además, medimos la neurogénesis adulta, que ocurre en la circunvolución dentada del hipocampo. Investigaciones anteriores han revelado una proliferación celular potenciada por los estrógenos en ratas hembra durante la fase de proestro8. Sin embargo, Lagace et al.41 encontraron que el ciclo estral no afecta la neurogénesis adulta en ratones, lo que sugiere la discrepancia entre ratas y ratones. En nuestro estudio, utilizamos varios marcadores para la proliferación de células y la diferenciación de neuronas, y no pudimos detectar ninguna diferencia significativa entre ratones machos y hembras. Es probable que la proliferación celular potenciada por estrógenos en ratas no pueda aplicarse a ratones; Se requiere más investigación para explorar la influencia del estrógeno en la neurogénesis del ratón adulto.

Sin embargo, hubo limitaciones y fallas en el diseño experimental, que podrían afectar los resultados en diferentes grados. En primer lugar, debido al tamaño limitado de la muestra, muchos de nuestros resultados carecían de poder estadístico suficiente. Entendemos que esto no es ideal, ya que una potencia baja podría aumentar la probabilidad de informar un resultado falso. Sin embargo, el bajo poder ha sido durante mucho tiempo un problema en los estudios con animales, cuyo poder estadístico medio está entre ~8% y ~31% en neurociencia26,42. No es una solución viable alcanzar un poder aceptable aumentando el tamaño de la muestra, ya que una diferencia muy pequeña en el tamaño del efecto requiere potencialmente una gran cantidad de animales y esto plantea desafíos tanto logísticos como éticos. Aún así, es posible que la diferencia de sexo desempeñe un papel con efectos de mayor tamaño. En segundo lugar, utilizamos una agenda bastante ocupada para las pruebas de comportamiento con descanso limitado entre pruebas. Esto podría causar un efecto de arrastre u otra posible interferencia en el rendimiento del ratón, convirtiéndose en factores de confusión durante la evaluación del comportamiento animal. En tercer lugar, los sujetos que utilizamos en este estudio fueron ratones C57BL/6 y no se probaron otras cepas ni tratamientos. Nuestros resultados sólo pueden representar la cepa C57BL/6 en condiciones basales, ya que las respuestas de los animales podrían diferir según los antecedentes genéticos y los factores ambientales. Existen posibles interacciones entre el sexo, los genes y/o las drogas. Esto también supone un desafío para la reproducibilidad de nuestros resultados43.

En conclusión, en general no se mostraron efectos significativos de la diferencia de sexo en nuestras pruebas de comportamiento, junto con la variación dentro del grupo, al menos con el tamaño de muestra que utilizamos en este proyecto. Podría decirse que para evitar datos sesgados por sexo, es importante tener esto en cuenta y considerar protocolos de diseño experimental que utilicen animales machos y hembras para que dichas interacciones puedan detectarse y explorarse. En resumen, este estudio proporciona evidencia de que no hubo diferencias de sexo significativas en los ensayos de comportamiento comúnmente utilizados en condiciones basales en ratones. Sugerimos que se considere la inclusión de sujetos femeninos en el diseño experimental.

Los experimentos se realizaron en 12 ratones C57BL/6 machos y 12 hembras, encargados al Centro Nacional de Animales de Laboratorio, Taiwán. Fueron alojados en instalaciones para animales certificadas por AAALAC en un ciclo de luz y oscuridad de 12:12 h (7:00 con luz encendida, 19:00 con luz apagada) a una temperatura de 22 °C y un nivel de humedad de 60 a 70%. Los animales tenían acceso ad libitum a comida y agua. Todos los ratones se criaron en la misma habitación, y tanto los machos como las hembras se alojaron en grupos, cuatro en una jaula, en el sistema de jaulas con ventilación individual (IVC). En total había 3 jaulas de ratones machos y 3 jaulas de hembras. No se observaron peleas ni pérdida de piel. Todos los procedimientos se llevaron a cabo de acuerdo con las regulaciones locales y fueron aprobados por el Comité Institucional de Uso y Cuidado de Animales de la Universidad Chang Gung (Número de permiso: CGU107-025). Zoletil se usó antes de la dislocación cuando se sacrificaron ratones y se recogieron tejidos.

Los ratones fueron sometidos a pruebas de comportamiento a la edad de 8 a 12 semanas, como se muestra en la línea de tiempo que se muestra en la Fig. 1a. Todas las pruebas de comportamiento se realizaron durante la fase activa del ratón. Los detalles experimentales se describen a continuación y en estudios previos21,22. Para la intensidad de la luz, realizamos el campo abierto bajo una lámpara cuya intensidad de luz fue de 400 lx. Para el laberinto elevado y la alimentación suprimida por novedad, utilizamos la luz amarilla cuya intensidad fue de 350 lx. En cuanto a las demás pruebas de comportamiento, se realizaron en la sala de comportamiento bajo luz blanca, donde la intensidad de la luz era de 440 lx. Todos los ratones se numeraron de M1 a M12 (machos) o de F1 a F12 (hembras). En cada ensayo de comportamiento, los ratones fueron evaluados en el orden de sus números diseñados y los sexos también se ordenaron alternativamente. Debido a las diferencias manifiestas en la apariencia de los animales entre machos y hembras, el experimentador no estuvo ciego al sexo del animal durante las pruebas de comportamiento. Sin embargo, la mayoría de los datos estadísticos fueron detectados y medidos automáticamente por la computadora.

Se siguieron las instrucciones del fabricante del medidor de fuerza de agarre (47,200, UGO BASILE). La barra de agarre se instaló en un transductor forzado que se conectaba al amplificador de pico. A los ratones se les permitió practicar el agarre tres veces antes de la prueba formal. Luego el investigador los jaló por la cola. La fuerza de agarre cuando los ratones soltaron la barra de agarre se registró como la fuerza de agarre máxima. Cada ratón fue probado tres veces y se registró la fuerza de agarre promedio.

Se utilizó Rotarod para evaluar la coordinación motora del ratón44. Los ratones se colocaron en el rotarod (Ugo BASILE), donde la varilla giraba a una velocidad inicial de 4 rpm y una velocidad de aceleración de 9 rpm por minuto. Una vez activada la aceleración, se registró el tiempo que tardaron los ratones en caerse de la varilla.

Se utilizó una viga de escalera para evaluar la coordinación motora del ratón45. Se colocaron ratones en un extremo del aparato y su jaula en el otro extremo. A los animales se les permitió practicar cruzar el aparato de viga de escalera una vez. Durante las pruebas formales, se quitaron 20 peldaños de metal del aparato y se registró el número de veces que los ratones saltaron un peldaño al cruzar. Cada ratón cruzó la escalera dos veces y se calculó el número promedio de fallas (peldaños perdidos).

Se utilizó Von Frey para probar la sensibilidad sensorial táctil46. Los ratones se colocaron individualmente en una cámara acrílica elevada equipada con un piso de malla de alambre y se aplicó un filamento de Von Frey (BiosebLab) desde abajo, pinchando las patas traseras. La fuerza del filamento de Von Frey aumentaría continuamente hasta que la pata se retirara y se registrara el umbral de retirada. Cada ratón fue pinchado cinco veces tanto en la pata trasera derecha como en la pata trasera izquierda. Se registró el umbral de retirada promedio de cada pata trasera.

Se utilizó una placa caliente para probar la sensibilidad sensorial térmica47. Los ratones se colocaron en la placa caliente (Socrel DS37) que mantuvo la temperatura a 55 °C. Se registró el tiempo que tardaron los ratones en saltar (definido como levantar cuatro extremidades al mismo tiempo).

Se utilizó campo abierto para evaluar el nivel de ansiedad48,49. Los ratones tuvieron libertad para explorar un área de forma circular (diámetro = 60 cm) durante 5 minutos con una lámpara como única fuente de luz que iluminaba la zona central. El software Ethovision registró la distancia recorrida, el tiempo pasado en la zona central (diámetro = 40 cm) y la frecuencia de entrada a la zona central. Cuando los ratones evitaron la zona central, la exploración disminuida (aumento de la tigmotaxis) se interpretó como una mayor ansiedad.

Se utilizó un laberinto en cruz elevado para evaluar el nivel de ansiedad50. Constaba de dos brazos abiertos (30 × 5 cm) y dos brazos cerrados que presentaban paredes de 15 cm de altura. El laberinto estaba elevado a 40 cm del suelo. Los ratones se colocaron en el laberinto durante 5 min. La distancia recorrida, el tiempo pasado en los brazos abiertos y la frecuencia de entrada a los brazos abiertos se registraron utilizando el software Ethovision. Como los ratones evitaron los brazos abiertos, la disminución de la exploración se interpretó como una mayor ansiedad.

Se utilizó un cuadro claro-oscuro para evaluar el nivel de ansiedad51. Estaba dividida en una caja oscura cubierta y una caja de luz sin cubierta. Al comienzo de la prueba, los ratones fueron colocados en la caja oscura cubierta y se les permitió transitar libremente entre la caja oscura y la caja de luz sin cubierta a través de una puerta. Los ratones tuvieron libertad para moverse en la cámara durante 5 minutos bajo luz blanca. El software Ethovision registró la distancia del viaje y la duración en la caja de luz junto con la frecuencia de entrada a la caja de luz. Cuando los ratones evitaron la caja de luz, la disminución de la exploración se interpretó como una mayor ansiedad.

Se utilizó alimentación novedosa suprimida para evaluar el comportamiento similar a la depresión52,53. Se impidió a los ratones consumir alimentos durante 24 h antes de la prueba. Durante la prueba, se colocó a los ratones en el centro de una jaula estándar y se les permitió moverse libremente. La jaula presentaba bolitas de comida colocadas en las cuatro esquinas y una lámpara que iluminaba la zona central. La latencia para acercarse a la comida y el tiempo dedicado a comer en 5 minutos se registraron manualmente. El mayor tiempo de latencia antes de que los ratones comieran la comida y la disminución medida en el tiempo de comida se consideraron indicadores de depresión.

Se utilizó la prueba de natación forzada para evaluar el comportamiento similar a la depresión54. Los ratones se colocaron en un cilindro de plástico (diámetro = 20 cm, altura = 50 cm) que se llenó con agua a temperatura ambiente (22 ℃), hasta una altura de 30 cm, y se registró el comportamiento de los ratones durante 6 minutos usando el software EthoVision. El aumento de la inmovilidad se consideró un indicador de depresión.

Se utilizó la prueba de suspensión de la cola para evaluar el comportamiento similar a la depresión55. Los ratones fueron suspendidos por su cola a una altura de 20 cm sobre el suelo y su comportamiento se registró durante 6 minutos utilizando el software EthoVision. El aumento de la inmovilidad se consideró un indicador de depresión.

Se utilizó el laberinto acuático de Morris para evaluar el aprendizaje espacial y la memoria56. Se llenó un tanque de agua circular (diámetro = 130 cm) con agua a 22 ℃ coloreada con trementina acrílica blanca, y se sumergió una plataforma circular (diámetro = 20 cm) 1 cm por debajo de la superficie del agua. Los ratones se colocaron en el tanque en tres posiciones iniciales diferentes; cada uno de los tres cuadrantes distintos del cuadrante con la plataforma. Cada ratón fue entrenado para buscar la plataforma oculta y permanecer en ella durante 30 s, tres pruebas al día durante cuatro días consecutivos. El tiempo que tardó cada ratón en encontrar la plataforma se registró utilizando el software EthoVision. La menor distancia necesaria para llegar a la plataforma fue una medida del aprendizaje espacial.

Se utilizó T maze para evaluar la memoria de trabajo57. Todas las puertas de guillotina del laberinto en T se levantaron antes de la prueba. Luego se colocó un ratón en el área de inicio y se le permitió elegir un brazo objetivo. El ratón se limitó al brazo elegido y al área de inicio durante 30 s deslizando silenciosamente la otra puerta hacia abajo. Luego se quitó el ratón y se volvió a colocar inmediatamente en el laberinto para seleccionar un brazo. La elección correcta se definió como que el ratón explorara el nuevo brazo. Cada ratón repitió el experimento tres veces y se calculó el porcentaje promedio de elecciones correctas. Cuando los ratones reconocieron el brazo familiar que acababan de explorar, el porcentaje de elecciones correctas fue indicativo de la memoria de trabajo.

Se utilizó la evitación activa para evaluar el aprendizaje de evitación que implicaba el condicionamiento del miedo58. Los ratones se colocaron en una caja transportadora de dos compartimentos equipada con un altavoz y una bombilla en cada compartimento (Med Associates, Inc). Se administraron estímulos condicionados (5 s de luz y 8 kHz, tono de 85 dB) en el compartimento donde se encontraba el ratón, seguidos de un estímulo incondicionado de una descarga eléctrica en el pie (0,3 mA) de las varillas conductoras subyacentes. Una vez que los ratones se trasladaron al otro compartimento o se cumplió el tiempo límite (10 s), los estímulos condicionados cesaron. Después de un intervalo aleatorio entre sesiones (rango de 3 a 10 s), comenzó la siguiente sesión. Los ratones repitieron 50 sesiones al día durante 4 días consecutivos. El mayor porcentaje de evitación fue un indicador de aprendizaje.

Los cerebros disecados se fijaron en paraformaldehído al 4% durante la noche y luego se deshidrataron en sacarosa al 25%. Se recogieron secciones de cerebro con un espesor de 40 µm y se almacenaron en tampón anticongelante antes de teñir.

Para la tinción inmunohistoquímica, se montaron secciones de cerebro en portaobjetos SuperFrost Plus (Thermo) y se secaron al aire durante la noche. Los portaobjetos se incubaron con tampón de ácido cítrico 0,01 M (pH = 6,4) durante 20 min a 95 °C (40 min en el caso de KI67), H2O2 al 3 % durante 5 min y luego se diluyó el anticuerpo primario (KI67 1:2500 Abcam ; Tbr2 1:1000 Abcam; NeuroD 1:500 Santa Cruz; DCX 1:3000 Abcam) a temperatura ambiente durante la noche; Los portaobjetos se lavaron con PBS durante 15 minutos (3 veces) entre cada paso. Posteriormente, utilizamos un kit estándar IgG ABC (Vector Lab) de acuerdo con las instrucciones del fabricante e incubamos los portaobjetos durante 5 a 10 minutos con tabletas de 3,3'-diaminobencidina (DAB) (Sigma). Luego, las secciones se tiñeron con violeta de cresilo y se montaron en un medio de montaje DPX (Sigma).

Para la cuantificación, todas las secciones se examinaron al microscopio con un aumento de 200x. Las células teñidas con anticuerpos se contaron en la circunvolución dentada bilateralmente cada ocho secciones en toda la extensión de la capa de células granulares (seis secciones por animal). Luego, el número de recuentos de células se multiplicó por ocho para obtener una estimación del total de células teñidas con anticuerpos en la circunvolución dentada (DG).

Recogimos las muestras de sangre mediante punción facial en tres estados diferentes: basal, estresado y recuperado. La sangre basal se recogió a las 21:00, mientras que la sangre estresada y recuperada se recogió a las 21:30 y 22:30, justo después de 30 min de estrés y 1 h de recuperación, respectivamente. Las muestras de sangre de diferentes estados se recolectaron en días diferentes, evitando posibles interferencias. El plasma se separó de la sangre completa mediante centrifugación (3000 rpm, 4 °C, 15 min) y se almacenó a -80 °C hasta su uso. La concentración de corticosterona en plasma se midió utilizando el kit ELISA de corticosterona (ADI-900-097, Enzo Life Sciences) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El ensayo elegido para el análisis de corticosterona en ratones ha sido validado en nuestro laboratorio, obteniendo valores consistentes de diferentes lotes de ratones control y resultados de otros22,59,60,61. Los coeficientes de variación (CV) intraensayo para nuestra prueba fueron del 4,83% y el CV entre ensayos fue del 10,34%, ambos aceptables para los resultados de ELISA.

Los datos se presentaron como media ± SEM para cada grupo. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001. Todos los resultados se analizaron estadísticamente para determinar la distribución normal mediante la prueba general de normalidad de D'Agostino y Pearson utilizando el software IBM SPSS y se realizaron utilizando el software Graphpad Prism. Los datos distribuidos normalmente se analizaron mediante un análisis de varianza (ANOVA) y una prueba t no apareada, según correspondiera; Los datos anormales se analizaron mediante la prueba de Mann-Whitney. La comparación de varianzas se analizó mediante la prueba F.

Los conjuntos de datos generados y analizados durante este estudio están disponibles del autor correspondiente a solicitud razonable.

Ericsson, AC, Crim, MJ y Franklin, CL Una breve historia del modelado animal. Missouri Med. 110, 201 (2013).

PubMed PubMed Central Google Académico

Perlman, RL Modelos de ratón de enfermedades humanas: una perspectiva evolutiva. Evol., Med., Salud Pública 2016, 170–176 (2016).

PubMed Google Académico

Levine, S. Diferencias sexuales en el cerebro. Ciencia. Soy. 214, 84–92 (1966).

Artículo de Google Scholar

Johnston, AL & File, SE Diferencias de sexo en pruebas de ansiedad con animales. Fisiol. Comportamiento. 49, 245-250 (1991).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Kokras, N. y Dalla, C. Diferencias de sexo en modelos animales de trastornos psiquiátricos. Hno. J. Farmacol. 171, 4595–4619 (2014).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Beery, AK y Zucker, I. Sesgo sexual en la neurociencia y la investigación biomédica. Neurociencias. Biocomportamiento. Apocalipsis 35, 565–572. https://doi.org/10.1016/j.neubiorev.2010.07.002 (2011).

Artículo PubMed Google Scholar

Solberg, LC et al. Un protocolo para el fenotipado de alto rendimiento, adecuado para el análisis cuantitativo de rasgos en ratones. Mamá. Genoma 17, 129-146. https://doi.org/10.1007/s00335-005-0112-1 (2006).

Artículo PubMed Google Scholar

Tanapat, P., Hastings, NB, Reeves, AJ y Gould, E. El estrógeno estimula un aumento transitorio en el número de nuevas neuronas en la circunvolución dentada de la rata hembra adulta. J. Neurosci. 19, 5792–5801. https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.19-14-05792.1999 (1999).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Scholl, JL, Afzal, A., Fox, LC, Watt, MJ y Forster, GL Diferencias sexuales en comportamientos similares a la ansiedad en ratas. Fisiol. Comportamiento. 211, 112670. https://doi.org/10.1016/j.physbeh.2019.112670 (2019).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Yagi, S. y Galea, LAM Diferencias sexuales en la cognición y la neurogénesis del hipocampo. Neuropsicofarmacología 44, 200–213. https://doi.org/10.1038/s41386-018-0208-4 (2019).

Artículo PubMed Google Scholar

Brookmeyer, R., Gray, S. & Kawas, C. Proyecciones de la enfermedad de Alzheimer en los Estados Unidos y el impacto en la salud pública de retrasar la aparición de la enfermedad. Soy. J. Salud Pública 88, 1337–1342 (1998).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

McPherson, S., Back, C., Buckwalter, JG y Cummings, JL Déficits cognitivos relacionados con el género en la enfermedad de Alzheimer. En t. Psicogeriatra. 11, 117-122 (1999).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Han, M. y col. Diferencias de género en la función cognitiva de pacientes con esquizofrenia crónica. Prog. Neuropsicofarmacol. Biol. Psiquiatría 39, 358–363 (2012).

Artículo de Google Scholar

Leung, MD y Psych, CMRC Diferencias de sexo en la esquizofrenia, una revisión de la literatura. Acta Psychiatrica Scandinavica 101, 3–38 (2000).

Artículo de Google Scholar

Yeh, CY, Wu, KY, Huang, GJ y Verkhratsky, A. Astrocitos de tallo radial (también conocidos como células madre neurales): identidad, desarrollo, fisiopatología y potencial terapéutico. Acta Physiol. 238, e13967 (2023).

Artículo CAS Google Scholar

Chari, T., Griswold, S., Andrews, NA y Fagiolini, M. La etapa del ciclo estral es fundamental para la interpretación del comportamiento de interacción social de las hembras. Frente. Comportamiento. Neurociencias. 14, 113 (2020).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Kästner, N., Richter, SH, Gamer, M., Kaiser, S. & Sachser, N. Qué diferencia hace un día: el comportamiento femenino es menos predecible cerca de la ovulación. R. Soc. Ciencia abierta. 4, 160998 (2017).

Artículo ADS PubMed PubMed Central Google Scholar

Beery, AK La inclusión de hembras no aumenta la variabilidad en los estudios de investigación con roedores. actual. Opinión. Comportamiento. Ciencia. 23, 143-149 (2018).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Williams, CL, Barnett, AM y Meck, WH Efectos organizativos de las secreciones gonadales tempranas sobre la diferenciación sexual en la memoria espacial. Comportamiento. Neurociencias. 104, 84–97. https://doi.org/10.1037//0735-7044.104.1.84 (1990).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Grissom, EM, Hawley, WR, Hodges, KS, Fawcett-Patel, JM y Dohanich, GP El sexo biológico influye en la preferencia de estrategias de aprendizaje y la unión del receptor muscarínico en regiones cerebrales específicas de ratas prepúberes. Hipocampo 23, 313–322. https://doi.org/10.1002/hipo.22085 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Chen, YJ y cols. La folistatina media el aprendizaje y la plasticidad sináptica mediante la regulación de la expresión de Asic4 en el hipocampo. Proc. Nacional. Acad. Ciencia. Estados Unidos https://doi.org/10.1073/pnas.2109040118 (2021).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Tsao, CH, Flint, J. & Huang, GJ Influencia de la fase diurna en las pruebas conductuales de rendimiento sensoriomotor, ansiedad, aprendizaje y memoria en ratones. Ciencia. Rep. 12, 432. https://doi.org/10.1038/s41598-021-03155-5 (2022).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Chen, CS, Knep, E., Han, A., Ebitz, RB y Grissom, NM Diferencias de sexo en el aprendizaje a partir de la exploración. Elife 10, e69748. https://doi.org/10.7554/eLife.69748 (2021).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Jonasson, Z. Metanálisis de las diferencias sexuales en modelos de aprendizaje y memoria de roedores: una revisión de datos biológicos y de comportamiento. Neurociencias. Biocomportamiento. Apocalipsis 28, 811–825. https://doi.org/10.1016/j.neubiorev.2004.10.006 (2005).

Artículo PubMed Google Scholar

Shoji, H. & Miyakawa, T. Cambios de comportamiento relacionados con la edad desde la juventud hasta la vejez en ratones macho de una cepa C57 BL/6J mantenida bajo un programa de estabilidad genética. Informes de neuropsicofarmacología 39, 100-118 (2019).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Botón, KS y col. Fallo de energía: por qué un tamaño de muestra pequeño socava la confiabilidad de la neurociencia. Nat. Rev. Neurociencias. 14, 365–376 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Sorge, RE et al. La exposición olfativa de los machos, incluidos los hombres, provoca estrés y analgesia relacionada en los roedores. Nat. Métodos 11, 629–632 (2014).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Balcombe, JP, Barnard, ND y Sandusky, C. Las rutinas de laboratorio provocan estrés en los animales. Mermelada. Asociación. Laboratorio. Animación. Ciencia. 43, 42–51 (2004).

CAS Google Académico

Azzi, L., El-Alfy, M., Martel, C. y Labrie, F. Diferencias de género en la morfología de la piel del ratón y efectos específicos de los esteroides sexuales y la dehidroepiandrosterona. J. Investigar. Dermatol. 124, 22-27 (2005).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Ross, JL, Queme, LF, Lamb, JE, Green, KJ y Jankowski, MP Diferencias de sexo en la sensibilización aferente del músculo primario después de una isquemia y una lesión por reperfusión. Biol. El sexo difiere. 9, 1-14 (2018).

Artículo CAS Google Scholar

Oyola, MG y Handa, RJ Ejes hipotalámico-pituitario-suprarrenal e hipotalámico-pituitario-gonadal: diferencias de sexo en la regulación de la capacidad de respuesta al estrés. Estrés 20, 476–494 (2017).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Nguyen, K., Kanamori, K., Shin, CS, Hamid, A. y Lutfy, K. El impacto del sexo en los cambios en los niveles plasmáticos de corticosterona y cotinina inducidos por la nicotina en ratones c57bl/6j. Ciencias del cerebro 10, 705 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Bethin, KE, Vogt, SK y Muglia, LJ La interleucina-6 es un estimulador esencial independiente de la hormona liberadora de corticotropina del eje suprarrenal durante la activación del sistema inmunológico. Proc. Nacional. Acad. Ciencia. 97, 9317–9322 (2000).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Handa, RJ, Burgess, LH, Kerr, JE y O'Keefe, JA Receptores de hormonas esteroides gonadales y diferencias sexuales en el eje hipotalámico-pituitario-suprarrenal. Horma. Comportamiento. Rev. 28, 464–476 (1994).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Babb, JA, Masini, CV, Day, HE y Campeau, S. Diferencias de sexo en las neuronas del factor liberador de corticotropina activadas dentro de los neurocircuitos relacionados con el estrés y las hormonas del eje hipotalámico-pituitario-suprarrenal después de la sujeción en ratas. Neurociencia 234, 40–52 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

MacLusky, Nueva Jersey, Yuan, H., Elliott, J. y Brown, TJ Diferencias de sexo en la unión de corticosteroides en el cerebro de rata: un estudio autorradiográfico in vitro. Res. cerebral. 708, 71–81 (1996).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Mogil, JS y Chanda, ML El caso a favor de la inclusión de sujetos femeninos en los estudios científicos básicos del dolor. Dolor 117, 1–5. https://doi.org/10.1016/j.pain.2005.06.020 (2005).

Artículo PubMed Google Scholar

Levy, DR y cols. El comportamiento espontáneo del ratón refleja una variación individual más que un estado estral. actual. Biol. https://doi.org/10.1016/j.cub.2023.02.035 (2023).

Artículo PubMed Google Scholar

Prendergast, BJ, Onishi, KG y Zucker, I. Ratones hembra liberados para su inclusión en neurociencia e investigación biomédica. Neurociencias. Biocomportamiento. Rev. 40, 1–5 (2014).

Artículo PubMed Google Scholar

Kaluve, AM, Le, JT y Graham, BM Las hembras de roedores no son más variables que los machos: un metanálisis de estudios preclínicos sobre el miedo y la ansiedad. Neurociencias. Biocomportamiento. Rev. 143, 104962 (2022).

Artículo PubMed Google Scholar

Lagace, DC, Fischer, SJ y Eisch, AJ El género y los niveles endógenos de estradiol no influyen en la neurogénesis del hipocampo adulto en ratones. Hipocampo 17, 175–180. https://doi.org/10.1002/hipo.20265 (2007).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Bonapersona, V., Hoijtink, H., Consortium, R., Sarabdjitsingh, RA y Joels, M. Aumento del poder estadístico de los experimentos con animales con datos de control históricos. Nat Neurosci 24, 470–477. https://doi.org/10.1038/s41593-020-00792-34 (2021).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Voelkl, B. y col. Reproducibilidad de la investigación con animales a la luz de la variación biológica. Nat. Rev. Neurociencias. 21, 384–393 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Hamm, RJ, Pike, BR, O'DEL, DM, Lyeth, BG y Jenkins, LW La prueba del rotarod: una evaluación de su eficacia para evaluar los déficits motores después de una lesión cerebral traumática. J. Neurotrauma 11, 187-196 (1994).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Metz, GA y Whishaw, IQ Las lesiones corticales y subcorticales afectan la habilidad para caminar en la prueba de caminar con peldaños de escalera: una nueva tarea para evaluar el paso, la colocación y la coordinación de las extremidades anteriores y posteriores. J. Neurosci. Métodos 115, 169-179 (2002).

Artículo PubMed Google Scholar

Carter, M., Shieh, JC y Nocicepción.,. Guía de técnicas de investigación en neurociencia 51–52 (Academic Press, 2010).

Google Académico

Eddy, NB y Leimbach, D. Analgésicos sintéticos. II. Ditienilbutenil y ditienilbutilaminas. J. Farmacol. Exp. Terapéutica 107, 385–393 (1953).

CAS Google Académico

Hall, C. & Ballachey, EL Un estudio del comportamiento de la rata en un campo. Una contribución al método en psicología comparada. Publicaciones de Psicología de la Universidad de California (1932).

Denenberg, VH Comportamiento en campo abierto en la rata: ¿Qué significa?. Ana. Académico de Nueva York. Ciencia. 159, 852–859 (1969).

Artículo ADS CAS Google Scholar

Pellow, S., Chopin, P., File, SE y Briley, M. Validación de entradas con brazos abiertos: cerrados en un laberinto en cruz elevado como medida de ansiedad en ratas. J. Neurosci. Métodos 14, 149-167 (1985).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Crawley, J. & Goodwin, FK Informe preliminar de un modelo de comportamiento animal simple para los efectos ansiolíticos de las benzodiazepinas. Farmacéutico. Bioquímica. Comportamiento. 13, 167-170 (1980).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Bodnoff, SR, Suranyi-Cadotte, B., Aitken, DH, Quirion, R. y Meaney, MJ Los efectos del tratamiento antidepresivo crónico en un modelo animal de ansiedad. Psicofarmacología 95, 298–302 (1988).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Dulawa, SC y Hen, R. Avances recientes en modelos animales de efectos antidepresivos crónicos: la prueba de hipofagia inducida por la novedad. Neurociencias. Biocomportamiento. Rev. 29, 771–783 (2005).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Porsolt, R., Bertin, A. y Jalfre, M. Desesperación conductual en ratones: una prueba de detección primaria de antidepresivos. Arco. En t. Farmacodina. El r. 229, 327–336 (1977).

CAS PubMed Google Académico

Steru, L., Chermat, R., Thierry, B. y Simon, P. La prueba de suspensión de la cola: un nuevo método para detectar antidepresivos en ratones. Psicofarmacología 85, 367–370 (1985).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Morris, R. Desarrollos de un procedimiento de laberinto acuático para estudiar el aprendizaje espacial en ratas. J. Neurosci. Métodos 11, 47–60 (1984).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Deacon, RM & Rawlins, JNP Alternancia del laberinto en T en el roedor. Nat. Protocolos 1, 7-12 (2006).

Artículo PubMed Google Scholar

Mowrer, OH y Lamoreaux, RR El miedo como variable interviniente en el condicionamiento de evitación. J.Comp. Psicólogo. 39, 29 (1946).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Chang, S. y col. NPTX2 es un componente clave en la regulación de la ansiedad. Neuropsicofarmacología 43, 1943-1953 (2018).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Hare, BD, Beierle, JA, Toufexis, DJ, Hammack, SE y Falls, WA Cambios asociados al ejercicio en la respuesta de la corticosterona al estrés agudo de inmovilización: evidencia de un aumento de la sensibilidad suprarrenal y una duración reducida de la respuesta de la corticosterona. Neuropsicofarmacología 39, 1262–1269 (2014).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

McClennen, SJ, Cortright, DN y Seasholtz, AF Regulación de los niveles de ácido ribonucleico mensajero de la proteína de unión a la hormona liberadora de corticotropina pituitaria mediante estrés por restricción y adrenalectomía. Endocrinología 139, 4435–4441 (1998).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Descargar referencias

Este estudio fue financiado por subvenciones del Chang Gung Memorial Hospital (CMRPD1M0831) y el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología de Taiwán (111-2320-B-182-007). Esta investigación también fue apoyada por el “Centro de Investigación de Medicina Molecular, Universidad Chang Gung” (EMRPD1L0341) del Programa del Centro de Investigación de Áreas Destacadas en el marco del Proyecto Sprout de Educación Superior del Ministerio de Educación de Taiwán.

Instituto de Graduados en Ciencias Biomédicas, Facultad de Medicina, Universidad Chang Gung, Taoyuan, 333, Taiwán

Chi-Hui Tsao, Kuan-Yu Wu y Guo-Jen Huang

Departamento de Ciencias Biomédicas, Facultad de Medicina, Universidad Chang Gung, Taoyuan, 33302, Taiwán

Nicole Ching Su y Guo-Jen Huang

Departamento de Psiquiatría, Hospital Dykebar, Servicio Nacional de Salud Greater Glasgow and Clyde, Paisley, PA2 7DE, Escocia

andres edward

Departamento de Neurología, Chang Gung Memorial Hospital-Linkou Medical Center, Taoyuan, 333, Taiwán

Guo-Jen Huang

Centro de Investigación de Medicina Molecular, Universidad Chang Gung, Taoyuan, 333, Taiwán

Guo-Jen Huang

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

GJ.H., KY.W. y AE concibieron el estudio y escribieron el manuscrito. CH.T., NCS y KY.W. Realizó experimentos con animales y analizó datos. El estudio se llevó a cabo de conformidad con las directrices ARRIVE.

Correspondencia a Guo-Jen Huang.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

Springer Nature se mantiene neutral con respecto a reclamos jurisdiccionales en mapas publicados y afiliaciones institucionales.

Acceso Abierto Este artículo está bajo una Licencia Internacional Creative Commons Attribution 4.0, que permite el uso, compartir, adaptación, distribución y reproducción en cualquier medio o formato, siempre y cuando se dé el crédito apropiado a los autores originales y a la fuente. proporcione un enlace a la licencia Creative Commons e indique si se realizaron cambios. Las imágenes u otro material de terceros en este artículo están incluidos en la licencia Creative Commons del artículo, a menos que se indique lo contrario en una línea de crédito al material. Si el material no está incluido en la licencia Creative Commons del artículo y su uso previsto no está permitido por la normativa legal o excede el uso permitido, deberá obtener permiso directamente del titular de los derechos de autor. Para ver una copia de esta licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Reimpresiones y permisos

Tsao, CH., Wu, KY., Su, NC y col. La influencia de la diferencia de sexo en el comportamiento y la neurogénesis del hipocampo adulto en ratones C57BL/6. Informe científico 13, 17297 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-44360-8

Descargar cita

Recibido: 03 de junio de 2023

Aceptado: 06 de octubre de 2023

Publicado: 12 de octubre de 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-44360-8

Cualquier persona con la que comparta el siguiente enlace podrá leer este contenido:

Lo sentimos, actualmente no hay un enlace para compartir disponible para este artículo.

Proporcionado por la iniciativa de intercambio de contenidos Springer Nature SharedIt

Al enviar un comentario, acepta cumplir con nuestros Términos y pautas de la comunidad. Si encuentra algo abusivo o que no cumple con nuestros términos o pautas, márquelo como inapropiado.

Blog